La tinción es una técnica microbiana, en la que se
utilizan diferentes colorantes, que son captados por las estructuras de las
muestras que se observan al microscopio, para una mejor diferenciación e
identificación:
Técnicas de Tinción:
Tinción de bacterias por el método GRAM:
1- Tome
una laminilla y agregue una gota de agua.
2- Con
un Asa microbiológica, tome una pequeña cepa y frótela sobre la gota de agua, extendiéndola
por toda la lamina.
3- Fije
la muestra, pasándola 10 veces sobre la flama del mechero a una distancia de 5
cm.
4- Adiciones
Cristal Violeta durante 1 min.
5- Lavar
con agua la lamina.
6- Adicione
Lugol durante 1 min.
7- Lavar
con suficiente agua.
8- Adicione
Alcohol Cetona durante 10 seg.
9- Lavar
con agua.
10-Adicione
Safranina durante 2 min.
11-Deje
secar la lámina.
Resultado:
Identificación
de bacterias Gram (+): La pared celular toma un color morado.
Identificación
de bacterias Gram (-): La pared celular toma un color rosado.
Bacilos
esporulados Gram (+)
Bacilos
Gram (-)
Tinción de Mohos:
1- Tome
una laminilla y agregue una gota de azul de lactofenol.
2- Con
un trozo de cinta transparente tome una parte de la cepa y póngala encima de la
gota.
3- Luego
tome un cubre-objetos y colóquelo encima de la cepa aislada.
Nota:
No
tome la cepa con un Asa microbiológica, pues esta puede causar el rompimiento
de los micelios del moho y no se podría visualizar muy bien en el microscopio.
Moho tomado de una naranja
Tinción de parásitos:
1- Tome
una laminilla y agregue una gota de Lugol parasitario.
2- Con
un Asa microbiológica, tome una pequeña cepa y frótela sobre la gota de agua.
3- Luego
tome un cubre-objetos y colóquelo encima de la cepa aislada.
Parásitos tomados de una muestra de agua residual
Tinción
de levaduras:
1- Tome
una laminilla y coloque una pequeña cepa sospechosa.
2-
Luego fije la muestra suavemente.
3- Agregue
una gota de Cristal Violeta o Azul de
lactofenol.
4- Enjuague
la laminilla.
4- Luego
tome un cubre-objetos y colóquelo encima de la cepa aislada.
NOTA: Se recomienda
agregar en la laminilla antes de visualizar en el microscopio, una gota de
aceite de inmersión para evitar el daño del lente óptico.
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